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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(十)
细菌基本组成
细胞壁(Cell wall)
细胞壁为细菌表面比较复杂的结构。是一层较厚(5～80nm)、质量均匀的网状结构，可承受细胞内强大的渗透压而不破坏。细胞壁坚韧而有弹性。
细胞膜(Cell membrane)
或称胞膜(Cytoplasmic membrane)位于细胞壁内侧，包绕在细菌胞浆外的具有弹性的半渗透性脂质双层生物膜。
胞浆(Cytoplasm)
是无色透明胶状物，基本成份是水、蛋白质、脂类、核酸及少量无机盐。细胞浆中还存在一些胞浆颗粒。
质粒(Plasmid)
这是染色体外的遗传物质，为双股环状DNA.分子量比染色体小，可携带某些遗传信息，例如耐药因子、细菌素及性菌毛的基本均编码在质粒上。质粒能进行独立复制，失去质粒的细菌仍能正常存活。质粒可通过接合、转导作用等将有关性状传递给另一细菌。
核糖体(Ribosome)
电镜下可见到胞浆中有大量沉降系数为70S的颗粒，即核糖体。其化学组成70%为RNA，30%为蛋白质。细胞中约90%的RNA和40%的蛋白质存在于核糖体中。当mRNA连成多聚核蛋白体(Polyribosome)，就成为合成蛋白质的场所。细菌的70S核糖体由50S和30S两个亚基组成。链霉素能与细菌核糖体的30S基结合，红霉素能与50S亚基结合，从而干扰细菌蛋白质的合成而导致细菌的死亡;真核细胞的核糖体为80S，因此对人体细胞则无影响。
胞浆颗粒(Cytoplasma granula)
大多数为营养贮藏物，较为常见的是贮藏高能磷酸盐的异染颗粒(Metachrometic granula)，嗜碱性较强，用特殊染色法可以看得更清晰。根据异染颗粒的形态及位置，可以鉴别细菌。
核质(Nnclear materal)或拟核(Nucleoid)
是细菌的遗传物质，决定细菌的遗传特征。
食品微生物检测过程
检疫审批：
也称检疫许可，是指在输入某些检疫物时，输入单位向检疫机关提前提出申请，检疫机关审查并决定是否批准输入的法律程序。
现场检验检疫：
指检验检疫人员在现场环境中对输入或输出的食品进行检查和抽样，即查验证单，查验证货相符，防疫消毒等，并根据需要采取样品进行实验室检验检疫等，并初步确定是否符合相关检疫要求的法定程序。
隔离检疫：
将进出境或国内调运的有关动植物在检疫机关指定的场所内，于隔离条件下进行饲养和种植，并在其生长期间进行检验。监测和处理的一项措施。 检疫处理：是检疫机关根据检验检测的结果以及相关规定，采用一定方式对检疫物实施处理的法定程序。
食品国境检疫：
指我国在开展食品的对外贸易中，为防止国外的动植物疫病，有害生物和食源性传染病经贸易渠道传入我国，以及保证进口食品符合进出口国卫生质量要求，有口岸机关进行的检疫。<...
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(九)
结核分枝杆菌的抵抗力
因细胞壁中含大量脂质，故抵抗力较强且与一般细菌不同，对干燥、酸碱和碱性染料抵抗力强(三强);而对乙醇、湿热及紫外线抵抗力较弱，抗结核药异烟肼、链霉素、利福平等有效(四不强)。
结核分枝杆菌的形态染色
结核分枝杆菌细长且直，不同种可呈现丝状、球状、串珠状等多形性。抗酸染色法是以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色，再以美蓝复染，结核分枝杆菌能抵抗酸酒精脱色，被染成红色，为抗酸染色阳性。
急性肾炎的概述
急性肾小球肾炎常简称急性肾炎。广义上系指一组病因及发病机理不一，但临床上表现为急性起病，以血尿、蛋白尿、水肿、高血压和肾小球滤过率下降为特点的肾小球疾病，故也常称为急性肾炎综合征。临床上绝大多数属急性链球菌感染后肾小球肾炎。本症是小儿时期最常见的一种肾脏病。年龄以3～8岁多见，2岁以下罕见。男女比例约为2∶1.
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(八)
检验士知识点总结
1. 将区带电泳和双向琼脂扩散相结合的免疫分技术称为免疫电泳;
2. 鉴别原发性纤溶与继发性纤溶亢进最有价值的是3P试验(3P试验对继发性纤溶有较好的特异性，但敏感性较差，所以目前建议用血浆D-二聚体检测代替之);
3. 原始细胞CD41阳性的急性白血病属于FAB分类的AML-M7;
4. 磺基水杨酸法测定尿蛋白最大优点是灵敏度高;
5. 甲醛常用于作尿液有形成分保存的防腐剂;
6. 口服抗凝药PT延长，血友病APTT延长;
7. 酶法测定血清胆固醇中用到的酶有：胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶;
8. 磷钨酸—镁试剂可选择性地沉淀VLDL和LDL;
9. 肠杆菌的主要性状包括：发酵葡萄糖、还原硝酸盐、需氧或兼性厌氧、触酶阳性;
10. 可用作B群链球菌鉴定试验是：CAMP试验和马尿酸钠水解试验;
11. 急性淋巴细胞白血病L1和L2在形态学上的鉴别主要依据有：细胞大小、胞浆量、胞核形态、核仁;
12. 骨髓原始细胞POX染色可呈阴性反应的是：急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性粒—单核细胞白血病、急性巨核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病;
13. PH计中的电极是属于玻璃电极;
14.可进行“冷增菌”的病原菌是：产单核细胞李斯特菌;
15.根据流行病学调查，使人致病的脑膜炎奈瑟主要是A，B，C和Y群，我国流行的以A群为主，欧美流行的主要是B、C群;
16.根据不同疾病采取不同的标本进行分离和培养，伤寒的第一、二周采血液，第二、三周采粪便与尿液，整个病程中骨髓分离阳性率阳性率高;
17.伯氏疏螺旋体是引起莱姆病的病原体，主要传播媒介是硬蜱;
18.回归热螺旋体以虱为传播媒介，引起流行性回归热;
19.赫姆硫螺旋体以蜱为传播媒介，引起地方性回归热;
20.宋内志贺菌迟缓分解乳糖，血清型属于D群，仅有一个血清型，其菌落常出现光滑型菌落，同时伴有扁平、较大、粗糙型菌落;
21.破伤风芽胞梭菌是引起破伤风的病原菌，对人的致病因素是它产生的外毒素;
22.流脑的病原菌是脑膜炎奈瑟氏菌，对干燥、寒冷、热等极为敏感;
23.没有细胞壁的原核细胞型微生物是支原体。
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(七)
肝的生物转化功能
在人整个生命过程中经常有某些外来异物(如毒物、药物、致癌物)进入体内，代谢过程中体内也不断产生一些生物活性物质及代谢物(激素、胺类等)。这些外来及内生物质大部分在肝内进行代谢转化。在肝内有关酶的催化下，一方面使上述物质的极性或水溶性增加，有利于从尿或胆汁排出，同时也改变了它们的毒性或药理作用。通常将这些物质在体内(主要是肝细胞微粒体内)的代谢转变过程称为生物转化作用(biotransformation)。
现已证明：肝、肾、胃肠道、肺、神经、皮肤及胎盘等组织都存在一些使毒物、药物及激素等进行生物转化的酶系，但以肝为最重要，其生物转化功能最强。
随着工业化和科学技术的发展，人们与各种化学物质接触的机会越来越多，常用的化学物质有63000种以上。对于人体来说，这些化学物质有的可能是药物，有的可能是对人体有害的毒物，有的可能是能诱发细胞癌变的致癌物。阐明这些物质在肝内生物转化的规律，对于保障人类的健康是很有意义的。
枯否细胞的功能
肝内存在的枯否细胞(Kupffercells，KC)实际是位于肝窦内的巨噬细胞，此类细胞的特点是其内质网及核膜上的内源性过氧化物酶活性。KC除具有吞噬、消灭病原微生物、清除机体内的内毒素、调节免疫和炎症反应等功能外，还能调控组织和基质修复、调控肝细胞、肝储脂细胞的增殖和合成细胞外基质等。
这些功能是通过枯否细胞所分泌的多种生物活性因子(如转化生长因子TGF、肝细胞生长因子HGF、胰岛素样生长因子ⅡIGFⅡ、转化生长因子βTGFβ、白介素6IL-6、白介素-1IL-1、肿瘤坏死因子αTNFα、干扰素IFN等)而起作用的。
肝内的枯否细胞、储脂细胞等与肝纤维化的形成有密切关系。
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(六)
乙醇性肝损伤知识汇总
本段着重叙述几种重要的乙醇性肝损伤：乙醇性脂肪肝、乙醇性肝炎、乙醇性肝硬化以及妊娠时由于孕妇饮酒而造成胎儿异常的胎儿性乙醇综合征(fetal alcohol syndrome，FAS)。
⒈乙醇性脂肪肝
过量摄入乙醇往往会引起脂肪肝的变化。乙醇中毒者脂肪肝的发生率可达70%-80%.此种脂肪肝主要是肝内中性脂肪的增加造成的。中性脂肪的来源包括经口摄取的脂肪、外周组织中的脂肪和肝内所合成的脂肪。
乙醇性脂肪肝形成机制包括：
①急性乙醇中毒时脂肪肝动员的增加，一次大量摄入乙醇，通过儿茶酚胺的作用引起储存脂肪的动员，同时伴有高脂血症的发生;
②慢性摄取乙醇时乙醇代谢亢进，NADH/NAD+比值上升，使磷酸二羟丙酮向α-磷酸甘油的转化增加，有利于肝内甘油三酯的大量合成;
③由于NADH的增加，NAD+的减少，导致三羧酸循环及脂肪酸的氧化被抑制，肝中脂肪酸的氧化降低;
④大量摄取乙醇时脂蛋白的合成及分泌减少。
乙醇性脂肪肝是良性的可逆性的病态，它可因戒酒而消退，可以认为乙醇性脂肪肝是由乙醇代谢亢进引起的代谢紊乱造成的后果。
⒉乙醇性肝炎
乙醇性肝炎在病理组织学上以肝细胞坏死为主要变化，伴有透明小体形成。关于此种肝细胞坏死的机制可能如下述：
①乙醇性肝损伤时的蛋白贮留和蛋白的分泌障碍：乙醇性肝损伤时不仅肝内脂肪量增加，且肝细胞液中有蛋白(白蛋白、运铁蛋白等)贮留;
②线粒体与内质网的损伤：乙醇及乙醛均作用于线粒体，造成线粒体损伤，后者与肝细胞坏死有关，长期摄入乙醇后MEOS这一代谢体系由平时占总代谢量的1/4升至1/2，所以内质网内乙醛的产生增加，也造成内质网的损伤;
③乙醇在微粒体氧化时，氧自由基使脂质过氧化，导致肝中还原型谷胱甘肽的减少和过氧化脂质的增加;
④乙醇引起的代谢亢进状态造成耗氧量的增加。
⑤乙醇性肝损伤时，会出现IgA增多、白细胞粘着能力降低等免疫功能异常。
⒊胎儿性乙醇综合征
胎儿性乙醇综合征是由于孕妇饮酒造成的胎儿异常，这是一种包含智能障碍的中枢神经系统的功能障碍，由出生前开始的发育障碍以及特有容貌和畸形为特征的综合征。FAS的动物模型表明其胎儿体重、大脑重量均较对照组为低，C-亮氨酸向脑核蛋白的掺入减少，脑内总RNA及tRNA减少。这表明FAS动物脑内蛋白质合成的抑制可解释人类FAS中智能发育延迟的现象。长期大量饮酒不仅危害人类的健康，还影响下一代的发育成长。
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(五)
试验室的质量体系
质量体系是将必要的质量活动结合在一起，以符合实验室认可的要求。必要的质量活动包括人员培训，实验过程改良、管理和文件控制，所有的实验室操作都必须标准化并被实验室工作人员所了解。
质量管理已成为现代化社会管理的核心问题之一，发达国家试图通过标准化工作和标准化组织将质量管理工作规范化。国际标准化组织在1987年颁布了ISO9000：1987的“质量管理和质量保证标准”文件。在1994年进行了修改并将之改为ISO9000：1994.到2000年对此文件作了很大的改动，并改名为“质量管理体系”代号为lSO9000：2000.
在此新标准中除了包括质量控制、质量保证以及质量改进的内容外，还引入一些新的质量管理理念如质量方针，质量目标，质量策划等，总之，就是质量(管理)体系，并在全世界形成一个质量体系认证活动。
质量管理体系的资源
实验室资源包括人员、设备、设施、资金、技术和方法等。衡量一个实验室的资源保障，主要反映在是否具有满足检验工作所需的各种仪器、设备(含各类试剂)、设施和一批具有经验、资历的技术人员和管理人员，这是保证具有高质量检验报告的必要条件。临床实验室为了维持、发展和提高学术素质与技术水平必须能够做好六个方面工作，即全面管理、人才培养、仪器装备、全面质量保证、创新和特色建设及临床意识。
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抗体催化的原理
1986年，由P.G.schultz和R.A.Lerner分别领导的两个小组同时证明抗体具有催化活性。针对一个四面体带电荷的磷酸酯半抗原产生的抗体，能有选择性地催化相应的碳酸脂和羧酸脂的水解反应。他们将这种有催化活性的抗体称为催化性抗体(catalytic antibody)，又称抗体酶(abozyme)。催化抗体的作用取决于底物分子水解时的转换态(transition state)。
转换态的分子结构是分子活化后的一种结构状态，处于转换态的分子具有最高的活化能，分子表现极性。处于这种状态的分子也是最不稳定的，能与这种分子结合的酶或者抗体会使某些化学键发生断裂(如酯键，碳键，胺键等)起到酶解作用。可见抗体酶的作用与天然的蛋白质酶非常相似。抗体酶也表现出对底物的专一性，对立体结构的专一性。
在饱和动力学与竞争性抑制方面都与常规酶相似。所以抗体酶的发现打破了只有常规酶才有的分子识别和加速催化反应的传统概念，为酶工程学开创了新的领域。
四种树突状细胞简介
1.滤泡树突状细胞(folliculardendritic cell，FDC)
FDC定居于淋巴结浅皮质区淋巴滤泡生发中心内。FDC与抗原抗体复合物高度亲合力，能够捕获和滞留抗原，并在记忆B细胞发育中起重要作用，是参与再次免疫应答的APC.
2.淋巴样树突状细胞(Lymphoiddendritic cell，LDC)
LDC主要分布在淋巴结和脾内，在移植排斥反应中起重要作用。
3.并指状细胞(interdigitatingcell，IDC)
IDC主要定位于淋巴组织胸腺依赖区，可能由皮肤Langerhans细胞移行而来。在淋巴组织中，IDC的星状突起插入其它细胞之间，故命名为并指状细胞。它可能是淋巴结中主要的APC，并对抗原特异性T细胞具有很强刺激作用。
4.朗格罕细胞(Langerhanscell，LC)
LC位于表皮和胃肠上皮，其特征性胞内结构是胞浆中的柱状Birbeck颗粒，该颗粒参与LC抗原呈递作用的各个环节。LC是定居在皮肤中的APC，约占皮肤细胞总数的5%～10%，在介导接触性皮肤超敏反应中起关键作用。
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c肽释放试验临床意义
C肽释放试验的做法与注意事项与葡萄糖耐量试验，胰岛素释放试验相同，它的临床意义是：
(1)测定C肽，有助于糖尿病的临床分型，有助于了解患者的胰岛功能。
(2)因为C肽不受胰岛素抗体干扰，对接受胰岛素治疗的患者，可直接测定C肽浓度，以判定患者的胰岛β细胞功能。
(3)可鉴别低血糖的原因。若C肽超过正常，可认为是胰岛素分泌过多所致，如C肽低于正常，则为其它原因所致。
(4)C肽测定有助于胰岛细胞瘤的诊断及判断胰岛素瘤手术效果，胰岛素瘤血中C肽水平偏高，若手术后血中C肽水平仍高，说明有残留的瘤组织，若随访中C肽水平不断上升，揭示肿瘤有复发或转移的可能。
甲型肝炎抗体
甲型肝炎抗体是针对甲肝的一种特异性抗体。甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)主要通过手-口途径传播，潜伏期15～50天，平均28天。
病毒常在患者血清ALT升高前的5～6天就存在于患者的血液和粪便中。发病2～3周后，随血清中特异抗体的产生，血清和粪便的传染性就逐渐消失。
并指状细胞介绍
并指状细胞主要定位于淋巴组织胸腺依赖区，可能由皮肤Langerhans细胞移行而来。
在淋巴组织中，IDC的星状突起插入其它细胞之间，故命名为并指状细胞。
它可能是淋巴结中主要的APC，并对抗原特异性T细胞具有很强刺激作用。
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并指状细胞
并指状细胞介绍：
并指状细胞主要定位于淋巴组织胸腺依赖区，可能由皮肤Langerhans细胞移行而来。
在淋巴组织中，IDC的星状突起插入其它细胞之间，故命名为并指状细胞。
它可能是淋巴结中主要的APC，并对抗原特异性T细胞具有很强刺激作用。
白蛋白生理作用
(1)维持血浆胶体渗透压的恒定
白蛋白是血浆中含量最多、分子最小、溶解度大、功能较多的一种蛋白质。血浆胶体渗透压的维持主要依靠血浆中的白蛋白，胶体渗透压是使静脉端组织间液重返回血管内的主要动力。当血浆白蛋白因病理条件引起下降时，血浆的胶体渗透压也随之下降，可导致血液中的水份过多进入组织液而出现水肿。
(2)血浆白蛋白的运输功能
血浆白蛋白能与体内许多难溶性的小分子有机物和无机离子可逆地结合形成易溶性的复合物，成为这些物质在血液循环中的运输形式。由此可见白蛋白属于非专一性的运输蛋白，在生理上具有重要性，与人体的健康密切相关。
(3)血浆白蛋白的其它生理作用
血浆中白蛋白的含量远比球蛋白多，亲水作用又比球蛋白大，这使血浆中的白蛋白对球蛋白起到一种胶体保护的稳定作用。当肝脏功能障碍引起白蛋白合成不足时，可使血浆球蛋白失去胶体保护作用，稳定性下降。血浆球蛋白的稳定性下降，将严重影响这些物质在体内的代谢、利用，引起相应的症状。此外，白蛋白还是人体内一种重要的营养物质。白蛋白在血浆中也不断地进行着代谢更新，血浆白蛋白分解产生的氨基酸，可用于合成组织蛋白，氧化分解以供应能量或转变成其它含氮物质。
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2018年卫生资格《检验技士》备考资料(一)
颗粒性抗原的制备
免疫原是诱导机体产生抗体、并能与抗体发生反应的物质。能否制得合格的抗体由许多因素决定，而能否制备合格的免疫原则是其前提条件。而且作为诊断试剂的抗原也必须是单一特异性的，即纯化的抗原。
自然众多的物质皆可成为免疫原，但绝少是单一成分(除非是合成的基因工程制备的)，所以必须将某个抗原从复杂的组分中提取出单一的成分。下面介绍有代表性的免疫原制备方法。
颗粒性抗原主要是指细胞抗原或细菌抗原。最常用的细胞抗原为制备溶血素用的绵羊红细胞。这种抗原制备比较简单，采集新鲜绵羊红细胞，以无菌盐水洗涤 3次(每次离心2000r/min10min)，最后配成106/ml浓度的细胞悬液，即可应用。
细菌抗原多用液体或固体培养物经集菌后处理。H抗原用有动力的菌株，菌液用0.3%～0.5%甲醛处理，而O抗原则需要100℃加温2～2.5h后应用。Vi抗原则应在杀菌后再加0.5 %～1%氯化钙溶液。有时虫卵也可做成抗原，如日本血吸虫卵抗原可制成悬液供免疫用。
有些细胞膜成分，如组织细胞膜、血细胞膜经打碎后亦可制成颗粒抗原。颗粒抗原悬液呈乳浊状，多采用静脉内免疫法，较少使用佐剂作皮内注射。
诱导免疫耐受
诱导受体对移植物的免疫耐受，是最理想的排斥反应防治措施。目前限于研究阶段，尚未应用于临床。
研究思路：
1.应用大剂量天然可溶性或人工合成的供者HLA分子，通过封闭同种抗原特异性T细胞的TCR，以诱导受者特异性T细胞凋亡。
2.输注可溶性CTLA～4，阻断被移植组织细胞的B7与受者T细胞表面CD28的结合，干扰共刺激信号的形成。
3.阻断CD40～CD40L、CD2～LFA3等膜分子的相互作用，使T细胞功能障碍。
4.借助基因工程技术制备基因修饰的树突状细胞，介导特异性耐受。
5.T细胞疫苗，诱导抗独特型抗体的产生，破坏移植物特异性T细胞
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